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為什么要進行細胞鑒定?

  行業動態     |      2023-07-04 10:53:29

為什么要進行細胞鑒定?

1.什么是細胞系鑒定?

所謂細胞系鑒定即通過STR(短串聯重復序列)圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后,細胞系可以通過定期的檢測,以防止出現細胞系被誤認或交叉污染的情況。

2.為什么要進行細胞系鑒定?

首先進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫藥的研究都采用培養細胞來進行,這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得來。據估計,15-20%的實驗室,實驗中所使用的細胞已經不是原來的細胞系,或者與其它細胞系發生了交叉污染。顯然,細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤,將會極大的威脅著基于這些細胞而發表的論文質量和研究發現的正確性。為此,很多細胞庫現在都要對提交來的細胞系進行鑒定,并對細胞系之間的交叉污染進行監測。

現在很多機構都已經認識到這個的重要性,ATCC和FDA,這些機構要求對用于制藥領域的實驗中所使用的材料—諸如細胞系—應該進行“身份鑒定”和純度測試。很多雜志也要求使用細胞系的文章提供STR指紋圖譜數據。

FDA建議研究人員在培養細胞的較早階段(細胞培養第一周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應再一次進行鑒定;對于活躍生長的細胞,每兩個月應鑒定一次;文獻發表前也應對細胞系身份進行鑒定。

如果一個實驗室使用不止一種細胞系,則應在實驗開始時,就要對所有的細胞系進行鑒定,以便排除交叉污染。

這樣將減少由于細胞系發生交叉污染或身份誤認,將導致實驗數據的無效或數據誤導。

3.如何進行細胞系鑒定?

細胞系鑒定目前主要基于身份認證委員會的標準。依據該標準,可以通過多重熒光PCR技術,對人源8個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。

4.什么時候需細胞系鑒定?

1)當建立或獲得一個新的細胞系時;

2)一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;

3)在細胞凍存之前,或細胞已連續培養2~3個月時;

4)發表文章或申請課題經費前;

5)細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大時;

6)當實驗室使用超過一種細胞系時,所有細胞系先鑒定以排除交叉污染的可能。

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